為什么展開劑的液面要低于樣品斑點

為什么展開劑的液面要低于樣品斑點

原因:如果液面高于斑點,樣品會直接溶解在展開劑中,整個展開劑都會被污染。

薄層色譜原理

薄層色譜(TLC)是固液吸附色譜的另一種形式,它與柱色譜的原理和分離過程相似。吸附劑的性質(zhì)和洗脫劑的相對洗脫能力也適用于TLC。

與柱色譜不同,薄層色譜中的流動相在薄板上沿吸附劑向上移動,而柱色譜中的流動相沿吸附劑向下移動。

TLC最大的優(yōu)點是:所需樣品少,展開速度快,分離效率高。薄層色譜法常用于鑒別和分離有機(jī)化合物,如通過與已知結(jié)構(gòu)的化合物比較,可以鑒別有機(jī)混合物的組成。薄層色譜法可用于跟蹤有機(jī)化學(xué)反應(yīng)中的反應(yīng)。在柱色譜分離中,薄層色譜常用于確定分離條件和監(jiān)控分離過程。

TLC不僅可以分離少量樣品(幾微克),也可以分離大量樣品(高達(dá)500毫克),特別適用于氣相色譜無法分離的揮發(fā)性低或高溫易變的化合物。

薄層色譜展開變歪的原因

薄層色譜變歪的原因如下。1.混合后沒有均勻搖動顯影劑。

運行時可預(yù)平衡或預(yù)飽和10分鐘左右。

2.薄板在運行時是傾斜的,一邊高一邊低。將膨脹圓筒放在水平實驗臺上,將平板垂直放入圓筒中。3.顯影劑的液面比斑點高,所以要注意,展開斑點時,斑點比顯影劑的液面高。4.采用的薄層板厚度不均勻,導(dǎo)致展開速度不一致。在這種情況下,需要更換另一個薄層板。

展開劑的液面高出薄板的樣點,將會產(chǎn)生什么后果

展開劑溶解樣品時,不會出現(xiàn)斑點,斑點會分散在背景或拖尾中。萃取分離時,用于分離兩種不同極性物質(zhì)的溶劑稱為展開劑,選擇合適的展開劑是首要任務(wù)。一般常用的溶劑都是按極性從小到大排列的,大概:石油醚己烷苯乙醚。

展開劑的比例取決于試驗。一般根據(jù)文獻(xiàn)**的這類化合物用什么樣的展開劑,先嘗試使用這類展開劑,然后不斷嘗試比例,直到找到分離效果好的展開劑。

展開劑:的選擇條件對所需組分有良好的溶解性;能分離成分;待測組分的Rf在0.2 ~ 0.8之間,定量測定在0.3 ~ 0.5之間;(4)不與待測組分或吸附劑發(fā)生化學(xué)反應(yīng);沸點適中,粘度低;展開后,組分斑點圓而集中;混合溶劑最好是新鮮配制的。

在紙層析法中,展開劑的液面高出濾紙上的樣點,將會產(chǎn)生什么后果

在紙層析中,展開劑的液面高于濾紙上的樣品點,展開劑溶解樣品時不會有斑點,斑點會分散在背景中產(chǎn)生拖尾。

由于液面不同位置的表面張力不同,當(dāng)紙條靠近液面時,其邊緣的表面張力較大,層析液沿濾紙邊緣擴(kuò)散過快,導(dǎo)致色素條帶出現(xiàn)不規(guī)則分離的現(xiàn)象。

因此,在插入色譜液體的濾紙條的一端切掉兩個角。

為了防止濾紙條倒入色譜溶液時色譜實驗失敗。同時,它還能防止色譜液 壁流 沿著濾紙條由于液體的表面張力,導(dǎo)致色素溶解。

擴(kuò)展數(shù)據(jù)

在環(huán)境分析和檢測中,有時采用紙色譜法分離樣品組分,用于一些準(zhǔn)確度較低的分析,如3,4-苯并芘。但不如氣相色譜和高效液相色譜普遍。

用于葉綠體色素的分離。葉子被壓碎,綠色的液體被浸出,液體

最后在濾紙上留下了四條色素帶,因此葉綠體中的色素可以通過紙層析清晰地分離出來。