為什么要測定酶的Km值,有什么意義?

為什么要測定酶的Km值,有什么意義?

意義重大。Km值是酶反應(yīng)速度為最大反應(yīng)速度一半時酶和底物濃度的特征常數(shù)。它與酶的性質(zhì)、底物和反應(yīng)條件有關(guān),但與酶的濃度無關(guān)。

大多數(shù)酶的Km值為10 ~ 10 mol/L。

Km可以近似表示酶與底物的親和力。Km值越大,酶與底物的親和力越小。根據(jù)K值和邁克爾曼方程,可以確定適宜的底物濃度。對于具有多種底物的酶,它們的K值是不同的。

對于同一底物,不同的酶有不同的K值。

km值的意義是指什么?

km值的顯著性是指酶促反應(yīng)速度與底物濃度的關(guān)系可以用米氏方程表示,酶促反應(yīng)速度與底物濃度的定量關(guān)系。當(dāng)酶促反應(yīng)速度達到最大反應(yīng)速度的一半時,Km值等于底物濃度。

酶的特征常數(shù)之一,不同的酶有不同的Km值,同一種酶與不同的底物反應(yīng)有不同的Km值,可以近似表示酶與底物的親和力:Km值大表示親和力小;較小的Km值表示親和力較高。

屬性分析:

1.研究酶促反應(yīng)動力學(xué)最重要的常數(shù)。當(dāng)酶促反應(yīng)達到其最大速度Vm的一半時,其值等于底物濃度,這可以指示酶和底物之間的親和力。Km值越大,親和力越弱,反之亦然。

2.當(dāng)酶被底物完全飽和時,反應(yīng)速度與酶濃度成正比。只與酶的結(jié)構(gòu)、酶催化的底物以及溫度、PH、離子強度等反應(yīng)環(huán)境有關(guān),與酶的濃度無關(guān)。

測定酶促反應(yīng)速度時為什么要以初速度為基準

酶促反應(yīng)的初始速率是指當(dāng)?shù)孜餃p少量/底物總量小于5%時的反應(yīng)速率。在這段時間內(nèi),反應(yīng)產(chǎn)物的量與時間成正比,反應(yīng)速率是某個值。但是,當(dāng)酶促反應(yīng)進行一定時間后,隨著底物的減少和產(chǎn)物的增加,酶促反應(yīng)產(chǎn)生的產(chǎn)物量不再與時間成正比,在此期間測得的酶促速率由于這些因素不能反映酶活性的水平。

測定酶促反應(yīng)速率為什么要以初速度

原因是:a:的底物濃度降低,b:酶在一定ph和溫度下使c:產(chǎn)物的倒掛反應(yīng)失活,產(chǎn)物上升加速逆反應(yīng)。因此,一般采用產(chǎn)物增加法,以酶促反應(yīng)的初速度為基礎(chǔ)來研究酶的反應(yīng)速度,因為底物濃度過量,測定不準確,產(chǎn)物從無到有,準確無誤。

酶促反應(yīng)動力學(xué)中km值有何意義

酶促反應(yīng)速度與底物濃度的關(guān)系可用米氏方程表示,酶促反應(yīng)速度與底物濃度的定量關(guān)系。Km值等于酶反應(yīng)速度達到最大反應(yīng)速度一半時的底物濃度,是酶的特征常數(shù)之一。

不同的酶有不同的Km值,同一種酶與不同的底物反應(yīng)有不同的Km值。Km值相近的反應(yīng)酶與底物的親和力為:Km值大表示親和力小;較小的Km值表示較大的親和力。

什么是米氏方程,米氏常數(shù)km的意義是什么

米氏方程表示酶促反應(yīng)的初始速度和底物濃度之間關(guān)系的速度方程。米氏常數(shù)(Km)表示當(dāng)酶促反應(yīng)達到最大速度(Vm)的一半時底物的濃度。

在酶促反應(yīng)中,在底物濃度較低的情況下,該反應(yīng)相對于底物是一級反應(yīng);然而,當(dāng)?shù)孜餄舛仍谥虚g范圍時,反應(yīng)(相對于底物)是混合階段反應(yīng)。

當(dāng)?shù)孜餄舛仍黾訒r,反應(yīng)從一級反應(yīng)過渡到零級反應(yīng)。

米氏常數(shù)是酶的特征物理量,其大小與酶的性質(zhì)有關(guān)。它在理論、實驗和實踐中都有廣泛的應(yīng)用

溫度對酶促反應(yīng)速度的影響一方面是溫度升高,酶促反應(yīng)速度加快。另一方面,隨著溫度的升高,酶的高級結(jié)構(gòu)會發(fā)生變化或變性,導(dǎo)致酶活性降低甚至喪失。

所以大多數(shù)酶都有一個最佳溫度。在最佳溫度下,反應(yīng)速度最大。

米氏常數(shù)是酶學(xué)和代謝研究中的重要特征數(shù)據(jù);

(1)如果同一個酶有幾種底物,則有幾種Km,尾值最小的底物一般稱為該酶的最適底物或天然底物。

不同底物的Km值不同,說明同一種酶對不同底物的親和力不同。通常,1/Km用于估算酶對底物的親和力。1/Km越大,酶對底物的親和力越大,酶促反應(yīng)越容易。

(2)知道了一個酶的Km,我們就可以計算出某個底物濃度下,某個反應(yīng)速率相當(dāng)于Vmax的百分比。

(3)測定酶活性時,如果初速度基本接近Vmax值,且過量底物不抑制酶活性,則[S]值一般應(yīng)大于Km值的10倍。

(4)催化可逆反應(yīng)的酶的Km對于陽性和陰性底物通常是不同的。通過測量這些Km值的差異和細胞內(nèi)正負底物的濃度,可以大致推斷該酶催化正負反應(yīng)的效率,對了解該酶在細胞內(nèi)的主要催化方向和生理功能具有重要意義。