為什么要測定酶的Km值,有什么意義?
為什么要測定酶的Km值,有什么意義?
意義重大。Km值是酶反應速度為最大反應速度一半時酶和底物濃度的特征常數(shù)。它與酶的性質、底物和反應條件有關,但與酶的濃度無關。
大多數(shù)酶的Km值為10 ~ 10 mol/L。
Km可以近似表示酶與底物的親和力。Km值越大,酶與底物的親和力越小。根據(jù)K值和邁克爾曼方程,可以確定適宜的底物濃度。對于具有多種底物的酶,它們的K值是不同的。
對于同一底物,不同的酶有不同的K值。
km值的意義是指什么?
km值的顯著性是指酶促反應速度與底物濃度的關系可以用米氏方程表示,酶促反應速度與底物濃度的定量關系。當酶促反應速度達到最大反應速度的一半時,Km值等于底物濃度。
酶的特征常數(shù)之一,不同的酶有不同的Km值,同一種酶與不同的底物反應有不同的Km值,可以近似表示酶與底物的親和力:Km值大表示親和力小;較小的Km值表示親和力較高。
屬性分析:
1.研究酶促反應動力學最重要的常數(shù)。當酶促反應達到其最大速度Vm的一半時,其值等于底物濃度,這可以指示酶和底物之間的親和力。Km值越大,親和力越弱,反之亦然。
2.當酶被底物完全飽和時,反應速度與酶濃度成正比。只與酶的結構、酶催化的底物以及溫度、PH、離子強度等反應環(huán)境有關,與酶的濃度無關。
測定酶促反應速度時為什么要以初速度為基準
酶促反應的初始速率是指當?shù)孜餃p少量/底物總量小于5%時的反應速率。在這段時間內,反應產(chǎn)物的量與時間成正比,反應速率是某個值。但是,當酶促反應進行一定時間后,隨著底物的減少和產(chǎn)物的增加,酶促反應產(chǎn)生的產(chǎn)物量不再與時間成正比,在此期間測得的酶促速率由于這些因素不能反映酶活性的水平。
測定酶促反應速率為什么要以初速度
原因是:a:的底物濃度降低,b:酶在一定ph和溫度下使c:產(chǎn)物的倒掛反應失活,產(chǎn)物上升加速逆反應。因此,一般采用產(chǎn)物增加法,以酶促反應的初速度為基礎來研究酶的反應速度,因為底物濃度過量,測定不準確,產(chǎn)物從無到有,準確無誤。
酶促反應動力學中km值有何意義
酶促反應速度與底物濃度的關系可用米氏方程表示,酶促反應速度與底物濃度的定量關系。Km值等于酶反應速度達到最大反應速度一半時的底物濃度,是酶的特征常數(shù)之一。
不同的酶有不同的Km值,同一種酶與不同的底物反應有不同的Km值。Km值相近的反應酶與底物的親和力為:Km值大表示親和力小;較小的Km值表示較大的親和力。
什么是米氏方程,米氏常數(shù)km的意義是什么
米氏方程表示酶促反應的初始速度和底物濃度之間關系的速度方程。米氏常數(shù)(Km)表示當酶促反應達到最大速度(Vm)的一半時底物的濃度。
在酶促反應中,在底物濃度較低的情況下,該反應相對于底物是一級反應;然而,當?shù)孜餄舛仍谥虚g范圍時,反應(相對于底物)是混合階段反應。
當?shù)孜餄舛仍黾訒r,反應從一級反應過渡到零級反應。
米氏常數(shù)是酶的特征物理量,其大小與酶的性質有關。它在理論、實驗和實踐中都有廣泛的應用
溫度對酶促反應速度的影響一方面是溫度升高,酶促反應速度加快。另一方面,隨著溫度的升高,酶的高級結構會發(fā)生變化或變性,導致酶活性降低甚至喪失。
所以大多數(shù)酶都有一個最佳溫度。在最佳溫度下,反應速度最大。
米氏常數(shù)是酶學和代謝研究中的重要特征數(shù)據(jù);
(1)如果同一個酶有幾種底物,則有幾種Km,尾值最小的底物一般稱為該酶的最適底物或天然底物。
不同底物的Km值不同,說明同一種酶對不同底物的親和力不同。通常,1/Km用于估算酶對底物的親和力。1/Km越大,酶對底物的親和力越大,酶促反應越容易。
(2)知道了一個酶的Km,我們就可以計算出某個底物濃度下,某個反應速率相當于Vmax的百分比。
(3)測定酶活性時,如果初速度基本接近Vmax值,且過量底物不抑制酶活性,則[S]值一般應大于Km值的10倍。
(4)催化可逆反應的酶的Km對于陽性和陰性底物通常是不同的。通過測量這些Km值的差異和細胞內正負底物的濃度,可以大致推斷該酶催化正負反應的效率,對了解該酶在細胞內的主要催化方向和生理功能具有重要意義。